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巨噬细胞清除原理。包裹着氯磷酸(方块)的脂质体通过巨噬细胞的内吞作用进入细胞,与溶酶体(L)融合后,在磷脂酶(箭头)的作用下,释放出氯磷酸,当细胞内氯磷酸的浓度达到一定浓度,就会对巨噬细胞造成不可逆转的损害,从而迫使其进入细胞凋亡。
liposomes脂质体15ml (1x10 ml + 1x5 ml)产品性质:
1ml脂质体体悬液中所含的氯磷酸大约为5mg。所用的磷酸盐缓冲液为10mMNa2HPO4,10mMNaH2PO4,140mMNaCl。
脂质体体内注射:
隔日尾静脉注射200μl Clodronate liposome,根据实验要求制定注射日程。通过免疫组化或流式检测巨噬细胞去除效率。
liposomes脂质体15ml (1x10 ml + 1x5 ml)尾静脉注射方法:
(1)将小鼠放在倒扣的饭盒内,从孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉,2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面,3条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉;
(2)将纱布浸泡于约70度的温水中,拿出后包裹尾巴,以达到使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的;
(3)行尾部静脉注射时,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出约2cm一段,使皮肤紧张,静脉更为充盈,右手持1ml针头注射器,使针头与静脉平行(小于30°角),从尾巴的下1/4处进针,开始注入药物时应缓慢,仔细观察,如果无阻力,无白色皮丘出现,说明已刺入血管,可正式注入药物。
(4)有的实验需连日反复尾静脉注射给药,注射部位应尽可能从尾端开始,按次序向尾根部移动,更换血管位置注射给药。拔出针头后,用棉球按住注射部位轻压1-2min,止血。
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